(Ως αξιόπιστος προμηθευτής, η HANGZHOU JECI BIOCHEM προσφέρει σταθερή-παραγωγή, υψηλής-ποιότητας NAD (Nicotinamide Adenine Dinucleotide, CAS 53‑84‑9), παρέχοντας αξιόπιστη υποστήριξη πρώτων υλών για εφαρμογές IVD και μεταβολικής ανάλυσης. Η συνεπής απόδοση και ο αυστηρός ποιοτικός έλεγχος μας καθιστούν προτιμώμενο συνεργάτη για διαγνωστική-προμήθεια NAD.)
Το NAD (δινουκλεοτίδιο νικοτιναμίδης αδενίνης) είναι ένα σημαντικό συνένζυμο που υπάρχει φυσικά στα κύτταρα, που υπάρχει σε δύο μορφές: οξειδωμένη μορφή (NAD+) και ανηγμένη μορφή (NADH). Μπορεί να αλληλομετατραπεί μέσω αντιδράσεων οξειδοαναγωγής, ρυθμίζοντας διάφορες βιολογικές διεργασίες όπως ο μεταβολισμός της κυτταρικής ενέργειας και η μεταγωγή σήματος. Το NAD συμμετέχει σε βασικές ενζυμικές αντιδράσεις για τη σύλληψη μεταβολών του μεταβολίτη και οι ανωμαλίες στα επίπεδα NAD και NADH και οι αναλογίες τους σχετίζονται στενά με την εμφάνιση και την ανάπτυξη πολλών ασθενειών. Ως εκ τούτου, έχει γίνει ένας σημαντικός δείκτης για τις κλινικές βιοχημικές δοκιμές και τον πρώιμο έλεγχο ασθενειών. Προϊόντα NAD υψηλής-καθαρότητας και υψηλής{5}}σταθερότητας-διαγνωστικής ποιότητας, ως βασικές πρώτες ύλες για in vitro διαγνωστικά αντιδραστήρια (IVD) και κιτ μεταβολικών δοκιμών, διαδραματίζουν βασικό ρόλο στη βελτίωση της ευαισθησίας ανίχνευσης και της αξιοπιστίας των αποτελεσμάτων.
Ιστορικό ανάπτυξης του διαγνωστικού-Βαθμού NAD
Το 1906, ο Άρθουρ Χάρντεν ανακάλυψε έναν «μυστηριώδη συνενζυμικό παράγοντα» που προάγει τον μεταβολισμό κατά τη διάρκεια της μελέτης του για τη ζύμωση αλκοόλης ζύμης (αργότερα αποδείχθηκε ότι είναι NAD).
Το 1929, ο Hans von Euler-Chelpin αναγνώρισε τη δινουκλεοτιδική δομή του NAD.
Το 1930, ο Otto Warburg διευκρίνισε τον μηχανισμό οξειδοαναγωγής μεταξύ NAD και NADH, διευκρινίζοντας ότι το NADH παρουσιάζει χαρακτηριστική απορρόφηση υπεριώδους στα 340 nm ενώ το NAD δεν έχει απορρόφηση σε αυτό το μήκος κύματος, θέτοντας τη θεωρητική βάση για ενζυμικές αναλύσεις.
Το 1948, οι Horecker et al. επιβεβαίωσε τον μοριακό συντελεστή εξάλειψης του NADH στα 340 nm, επιτρέποντας την άμεση ποσοτικοποίηση των ρυθμών της ενζυμικής αντίδρασης μέσω αλλαγών απορρόφησης [1].
Το 1961, ο Oliver H. Lowry καθιέρωσε τη μέθοδο NAD(P)/H cycling, πρωτοπορώντας την ποσοτική ανάλυση ιστού/κυτταρικού NAD(P)/H.
Από το 1962 έως το 1963, η Boehringer Mannheim (αργότερα αποκτήθηκε από τη Roche) κυκλοφόρησε ένα κιτ αντιδραστηρίου βασισμένο στην ανίχνευση απορρόφησης NADH 340 nm για τη γαλακτική αφυδρογονάση (LDH), επιτυγχάνοντας την πρώτη εμπορική εφαρμογή διαγνωστικής-βαθμίδας NAD ως πρώτης ύλης συνενζύμου.
Το 1973, οι Bernofsky et al. καθιέρωσε την αρχή του συστήματος ενίσχυσης ADH-PES-MTT (χρωματομετρικό σύστημα ADH-PES-MTT) [2];同年, Kato et al. Το (Lowry Laboratory) ανέπτυξε τη μέθοδο ADH-MDH dual-κύκλου ενζύμου, επιτρέποντας την εξαιρετικά ευαίσθητη ανίχνευση NAD/NADH [3].
Έκτοτε, η διαγνωστική-βαθμίδα NAD έχει γίνει βασική πρώτη ύλη για βιοχημικές δοκιμές ρουτίνας και επεκτείνεται συνεχώς σε τομείς αιχμής{{1}, όπως η έρευνα βιοδεικτών νευροεκφυλιστικών ασθενειών, η παρακολούθηση του μεταβολισμού του όγκου και η αξιολόγηση της γήρανσης.
Σενάρια εφαρμογής NAD διαγνωστικού βαθμού -
Βασικές Πρώτες Ύλες για Κλινική Βιοχημική Διάγνωση
① Ανίχνευση γαλακτικής αφυδρογονάσης (LDH).
Αρχή ανίχνευσης:
Γαλακτικό+NAD+⟶LDHΠυροσταφυλικό+NADH+H+
Σενάρια εφαρμογής: Καρδιολογικό Τμήμα (διάγνωση οξέος εμφράγματος μυοκαρδίου), Κλινικό εργαστήριο (διάγνωση αιμολυτικής αναιμίας), Ηπατολογία (εκτίμηση ηπατικής κυτταρικής βλάβης) κ.λπ.
Φυσιολογικό εύρος LDH: 140 - 280 U/L (ενήλικες, υπάρχουν διαφορές μεταξύ των μεθόδων)
Κλινική Σημασία: > 280 U/L (υποδηλώνει βλάβη ιστού (ήπαρ, καρδιά, νεφρό, μυς, πνεύμονες, κ.λπ.)), > 500 U/L (συχνά παρατηρείται σε έμφραγμα του μυοκαρδίου, αιμολυτική αναιμία, κακοήθεις όγκους, σοβαρές λοιμώξεις).
② Ανίχνευση μηλικής αφυδρογονάσης (MDH).
Αρχή ανίχνευσης:
Μηλικό οξύ+NAD+⟶MDHΟξαλοοξικό οξύ+NADH+H+
Σενάρια εφαρμογής: Κλινικά Αντιδραστήρια (διάγνωση μιτοχονδριακής νόσου), Πεδίο Επιστημονικής Έρευνας (έρευνα μιτοχονδριακής λειτουργίας) κ.λπ.
Κανονικό εύρος MDH: 12.5 - 50 U/L (διαφορετικά εργαστήρια έχουν μικρές διαφορές λόγω μεθόδων ανίχνευσης και αντιδραστηρίων)
Κλινική Σημασία: Η ανύψωση υποδηλώνει μιτοχονδριακή βλάβη, νέκρωση ιστού κ.λπ.
③ Ανίχνευση ισοιτρικής αφυδρογονάσης (ICDH).
Αρχή ανίχνευσης:
Ισοσιτρικό οξύ+NAD+⟶ICDH -Κετογλουταρικό οξύ+NADH+H+
Σενάρια εφαρμογής: Διάγνωση Κλινικής Μιτοχονδριακής Νόσου, Πεδίο Επιστημονικής Έρευνας (αξιολόγηση ηπατικής βλάβης, έρευνα ενεργειακού μεταβολισμού) κ.λπ.
Κανονικό εύρος ICDH: 1 - 5 U/L (ορός)
Κλινική Σημασία: Η ανύψωση υποδηλώνει μιτοχονδριακή βλάβη, ηπατοκυτταρική βλάβη, νέκρωση ιστού κ.λπ.
④ Ανίχνευση κινάσης κρεατίνης (CK).
Αρχή ανίχνευσης:
Φωσφοκρεατίνη+ADPGγλυκόζη+ATPG-6-P+NAD+⟶CKΚρεατίνη+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Σενάρια Εφαρμογής: Καρδιολογικό Τμήμα (οξύ έμφραγμα μυοκαρδίου, μυοκαρδίτιδα), Ορθοπαιδικό/Επείγοντα Τμήμα (μυϊκή κάκωση, ραβδομυόλυση), Νευρολογικό (μυοπάθεια) κ.λπ.
Φυσιολογικό εύρος CK: Αρσενικά 38 - 174 U/L; Γυναίκες 26 - 140 U/L (διαφορές μεταξύ των μεθόδων)
Κλινική Σημασία: Τα αυξημένα επίπεδα υποδηλώνουν τραυματισμό του μυοκαρδίου ή του σκελετικού μυός, που παρατηρείται συνήθως σε έμφραγμα του μυοκαρδίου, μυοκαρδίτιδα, ραβδομυόλυση, έντονη άσκηση κ.λπ.
⑤Ανίχνευση γλυκόζης
Αρχή ανίχνευσης:
Γλυκόζη+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Σενάρια Εφαρμογής: Ενδοκρινολογία (διάγνωση διαβήτη και παρακολούθηση γλυκόζης αίματος), Τμήμα Επειγόντων Περιστατικών (υπογλυκαιμικό κώμα, διάγνωση έκτακτης ανάγκης υπεργλυκαιμίας), Ιατρική Εντατικής Θεραπείας (παρακολούθηση γλυκόζης αίματος ασθενών ΜΕΘ) κ.λπ.
Φυσιολογικό εύρος γλυκόζης: Νηστεία 3.9 - 6.1 mmol/L; 2 ώρες μετά το γεύμα < 7,8 mmol/L
Κλινική Σημασία: Αυξημένα επίπεδα παρατηρούνται σε διαβήτη, υπεργλυκαιμία στρες. Μειωμένα επίπεδα παρατηρούνται σε υπογλυκαιμία, ινσουλίνωμα, σοβαρή ηπατική νόσο κ.λπ.
⑥ Ανίχνευση Γαλακτικού
Αρχή ανίχνευσης:
Γαλακτικό+NAD+⟶LDHΠυροσταφυλικό+NADH+H+
Σενάρια εφαρμογής: Τμήμα Επειγόντων Περιστατικών (εκτίμηση καταπληξίας/ιστικής υποξίας), ΜΕΘ (μετά - κρίση διάσωσης κρίσιμων ασθενών), Καρδιολογικό Τμήμα (καρδιακή ανεπάρκεια), Λοιμώδη Νοσήματα (σηψαιμία), Αθλητιατρική (αξιολόγηση φυσικής ικανότητας αθλητών) κ.λπ.
Φυσιολογικό εύρος γαλακτικού: 0.5 - 2.2 mmol/L (φλεβικό αίμα)
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑦ Ανίχνευση Γαλακτόζης
Αρχή ανίχνευσης:
-D-Γαλακτόζη+NAD+⟶GalDHΓαλακτονικό οξύ+NADH+H+
Σενάρια εφαρμογής: Έλεγχος Νεογνών (Διάγνωση Γαλακτοζαιμίας), Παιδιατρική (Εγγενή Σφάλματα Μεταβολισμού), Γαστρεντερολογία (Εντοπισμός Δυσανεξίας Λακτόζης), Ηπατολογία (Εκτίμηση Ηπατικής Λειτουργίας) κ.λπ.
Φυσιολογικό εύρος γαλακτόζης: Ορός νηστείας: < 0,28 mmol/L; Νεογέννητα: < 1,11 mmol/L
Κλινική Σημασία: Αυξημένα επίπεδα παρατηρούνται σε γαλακτοζαιμία, ηπατική ανεπάρκεια, συγγενή ανεπάρκεια μεταβολικών ενζύμων γαλακτόζης κ.λπ.
⑧ Ανίχνευση αιθανόλης
Αρχή ανίχνευσης:
Αιθανόλη+NAD+⟶ADHΑκεταλδεΰδη+NADH+H+
Σενάρια εφαρμογής: Τμήμα Επειγόντων Περιστατικών (Διάγνωση Οξείας Αλκοολικής Δηλητηρίασης), Κέντρο Φυσικής Εξέτασης (Αλκοολοτεστ Οδηγού), Ιατροδικαστική Ταυτοποίηση (Μέτρηση Συγκέντρωσης Αλκοόλ στο αίμα) κ.λπ.
Κανονική Εύρος Αιθανόλης: 0 mmol/L (Μη-άτομα που δεν πίνουν)
Κλινική Σημασία: Τα αυξημένα επίπεδα υποδηλώνουν κατανάλωση αλκοόλ ή δηλητηρίαση από αλκοόλ. Οι υπερβολικά υψηλές συγκεντρώσεις μπορεί να οδηγήσουν σε καταστολή του κεντρικού νευρικού συστήματος, αναστολή του αναπνευστικού και του κυκλοφορικού συστήματος.
⑨ -Ανίχνευση υδροξυβουτυρικού
Αρχή ανίχνευσης:
-Υδροξυβουτυρικό οξύ+NAD+⟶ -HBDHΑκετοξικό οξύ+NADH+H+
Σενάρια εφαρμογής: Ενδοκρινολογία (Διάγνωση Διαβητικής Κετοξέωσης), Διατροφή (Παρακολούθηση Διατροφικής Πρόσληψης) κ.λπ.
Φυσιολογικό εύρος -υδροξυβουτυρικού: Αίμα νηστείας: < 0,27 mmol/L (Διαφορές μεταξύ των μεθόδων)
Κλινική Σημασία: Τα αυξημένα επίπεδα υποδηλώνουν διαβητική κετοξέωση, ασιτία, μακροχρόνια νηστεία, αλκοολική κετοξέωση κ.λπ.
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑨ -Ανίχνευση υδροξυβουτυρικού οξέος
Αρχή ανίχνευσης:
-Υδροξυβουτυρικό οξύ+NAD+⟶ -HBDHΑκετοξικό οξύ+NADH+H+
Σενάρια εφαρμογής: Ενδοκρινολογία (Διάγνωση Διαβητικής Κετοξέωσης), Διατροφή (Παρακολούθηση Διατροφής) κ.λπ.
Φυσιολογικό εύρος -Υδροξυβουτυρικού οξέος: Αίμα νηστείας: < 0,27 mmol/L (Διαφορές μεταξύ των μεθόδων)
Κλινική Σημασία: Τα αυξημένα επίπεδα υποδηλώνουν διαβητική κετοξέωση, ασιτία, μακροχρόνια νηστεία, αλκοολική κέτωση κ.λπ.
Βιοδείκτες για την αξιολόγηση της νόσου
Το NAD, ως βιοδείκτης για την αξιολόγηση της νόσου, βρίσκεται επί του παρόντος στο στάδιο της κλινικής μετάφρασης. Το 2022, το κιτ ανίχνευσης Q-NADMED Blood NAD⁺/NADH της NADMED έγινε το πρώτο προϊόν ανίχνευσης NAD στον κόσμο που έλαβε πιστοποίηση CE-IVD (In Vitro Diagnostic Medical Devices Directive). Ανιχνεύει τις συγκεντρώσεις NAD+ και NADH στο ανθρώπινο ολικό αίμα, με όρια ανίχνευσης NAD+: 330 nM. NADH: 119 nM. Η συγκέντρωση NAD+ στο ολικό αίμα υγιών ενηλίκων είναι περίπου 18 μM (εύρος: 15–23 μΜ) [4], που χρησιμοποιείται για την ποσοτική ανίχνευση ολικού αίματος και την παρακολούθηση των θεραπευτικών επιδράσεων των πρόδρομων ουσιών του NAD. Ωστόσο, δεν έχει ακόμη εγκριθεί ως ανεξάρτητο διαγνωστικό κριτήριο της νόσου.
Στον τομέα της επιστημονικής έρευνας, η πιθανή τιμή της αναλογίας NAD/NADH στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό ή στο αίμα σε νευροεκφυλιστικές ασθένειες (π.χ. νόσος Alzheimer, νόσος του Πάρκινσον), μεταβολισμός όγκων και εκτίμηση γήρανσης μελετάται σε βάθος [5−8], αλλά επί του παρόντος εφαρμόζεται κυρίως σε κλινικές δοκιμές και κλινική έρευνα έρευνας, αντί για συνηθισμένη διάγνωση.
>Τοπίο αγοράς διαγνωστικού-βαθμού NAD<
Επί του παρόντος, η παγκόσμια αγορά διαγνωστικού-βαθμού NAD βρίσκεται σε ένα στάδιο ταχείας ανάπτυξης που καθοδηγείται από την ανάπτυξη της τεχνολογίας και της ζήτησης. Ο κλάδος μεταβαίνει ταχέως από τις εισαγωγές-που κυριαρχούνται στην εγχώρια υποκατάσταση. Το in vitro διαγνωστικό πεδίο παρουσιάζει δομική διαφοροποίηση: αν και ο συνολικός αριθμός των κιτ αντιδραστηρίων έχει μειωθεί, κορυφαίες επιχειρήσεις (π.χ. Roche Diagnostics, Mindray Medical) παραμένουν σταθερές και επεκτείνονται σε νέα έργα, όπως μεταβολικές δοκιμές και αξιολόγηση γήρανσης, ενώ οι μικρές και μεσαίες-επιχειρήσεις μειώνουν τις γραμμές παραγωγής λόγω πίεσης κέρδους.
Οι κύριοι προμηθευτές διαγνωστικού-βαθμού NAD περιλαμβάνουν: Roche, Oriental Yeast, SunClone Bio, Shenzhen Bangtai, κ.λπ.
Αναφορές
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Οι συντελεστές εξαφάνισης της μειωμένης ζώνης των νουκλεοτιδίων πυριδίνης[J]. J Biol Chem, 1948, 175(1): 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Μια βελτιωμένη δοκιμασία κύκλου για δινουκλεοτίδιο νικοτιναμίδης αδενίνης[J]. Anal Biochem, 1973, 53(2): 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S, et al. Μια μέθοδος ενζυμικού κύκλου για το δινουκλεοτίδιο νικοτιναμίδης - αδενίνης με μηλικές και αλκοολικές αφυδρογονάσες[J]. Anal Biochem, 1973, 56(2): 392 - 8.
[4] NATALIA V Balshova, Lev G Zavileysky, Artem V Artukhov, et al. Αποτελεσματικός προσδιορισμός και Σημασία δείκτη του NAD+ στο ανθρώπινο αίμα[J]. Front Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Ένα νέο σύστημα ανίχνευσης βιοδεικτών και η εφαρμογή του στην Κίνα[Δίπλωμα ευρεσιτεχνίας]. Κίνα, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J, et al. A Type of Fluorescent Probe for Detecting Pyrimidine Nucleosides and Its Preparation Method and Application: China, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y, et al. Χρωμογονικός Προσδιορισμός του Δινουκλεοτιδίου Νικοτιναμίδης Αδενίνης και των Μεταβολιτών του Χρησιμοποιώντας Νουκλεοζίτες Πυριδίνης ως Συμπαράγοντες και Εφαρμογή του στη Διάγνωση ή Θεραπεία Ζυμωτικών Υγρών[J]. Κίνα, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ, et al. Εφαρμογή του NAD⁺ ως μοριακού δείκτη για προσαρμοσμένη ανάπτυξη προϊόντων για τη διάγνωση δυσφορίας γυναικείων γεννητικών οργάνων[J]. Κίνα, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.
